Síntesis en fase sólida
En pocas palabras La síntesis en fase sólida es el procedimiento habitual para fabricar péptidos por vía química. La cadena crece aminoácido a aminoácido sobre una resina de soporte sólida.
Cada ciclo acopla un bloque y retira después su grupo protector, para que pueda seguir el siguiente. Los excesos se lavan sin que el péptido en crecimiento abandone la resina.
Al final la cadena terminada se separa del soporte y se purifica, normalmente por HPLC preparativa. De ese paso procede también el contraión que después queda adherido a la molécula.
Como cada ciclo tiene una pequeña tasa de error, el rendimiento cae con la longitud de la cadena. Por eso los péptidos largos son más laboriosos y más caros que los cortos.
El proceso consiste en tres gestos que se repiten: retirar el grupo protector temporal del extremo de la cadena, acoplar en exceso el siguiente aminoácido y lavar todo lo sobrante. Como la cadena en crecimiento está fijada a la resina, para separar basta un enjuague en lugar de una purificación completa.
Ningún ciclo transcurre por completo. Si en un grano falla un acoplamiento, la cadena sigue creciendo sin ese eslabón y aparece una molécula muy próxima en masa a la buscada. Esos defectos son la razón principal de que la pureza nunca llegue al cien por cien.
La separación se hace casi siempre con ácido trifluoroacético, que a la vez retira los grupos protectores de las cadenas laterales y queda en la molécula como contraión.